藥物研發(fā)中穩(wěn)定性研究是一項重要的研究內(nèi)容。其中使用期間穩(wěn)定性試驗是考察包裝制劑對臨床和患者安全使用不可或缺的內(nèi)容，其主要針對兩部分制劑：

1、使用前需要重新配制的制劑，主要考察藥物在配制或稀釋過程中不同種類、不同形態(tài)、不同體積的組分在混合過程中可能會發(fā)生各種化學物理變化，從而產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物導(dǎo)致雜質(zhì)譜的改變，以及在配制過程中可能引入的細菌、微生物等新的污染；

2、多劑量包裝制劑，主要是初次使用后會不可避免地接觸到空氣、水分、光等外界因素從而可能影響含量、外觀、產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物，重復(fù)打開使用和關(guān)閉操作也可能導(dǎo)致微生物的污染，細菌繁殖等。對于注射給藥制劑、眼用制劑以及吸入制劑，由于此類制劑對于微生物限度要求較高，如果藥物在使用期間質(zhì)量不符合要求會造成潛在的安全隱患，因此使用期間穩(wěn)定性試驗顯得尤為重要。

針對此，EMA、ICH和WHO等均發(fā)布了相關(guān)指導(dǎo)原則從而有效指導(dǎo)了使用期間穩(wěn)定性試驗的開展。筆者將從1、批次的選擇及考察時期，2、試驗期間樣品放置條件，3、考察指標，三個方面對各指導(dǎo)原則中穩(wěn)定性研究的技術(shù)要求進行探討并對比，幫助申請人更好的辨別不同申報方向的上市申報的具體要求，更有利于產(chǎn)品的上市注冊申報。

01

批次的選擇及考察時期

EMA和WHO均要求至少考察兩批，其中一批至少為中試規(guī)模，至少一批為近效期樣品，若遞交時不能獲得近效期樣品，如果申報時不能獲得近效期樣品，則在申報時可獲得的最后一個時間點取樣考察。EMA同時要求使用的包裝系統(tǒng)應(yīng)等同于上市包裝系統(tǒng)，針對樣品為多個規(guī)格或采用多種包裝材料，可以采用最容易引起變化的規(guī)格或包裝，同時給出選擇理由。

ICH要求采用與穩(wěn)定性試驗相同的主批次，但未明確采用的批次數(shù)目。應(yīng)在長期穩(wěn)定性開始及試驗結(jié)束時取樣考察。如果申報時不能獲得近效期樣品，則在第12個月或申報時可獲得的最后一個時間點取樣考察。

FDA未明確采用的批次數(shù)目以及考察時期。

CDE在化學藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價技術(shù)要求里指出，對于穩(wěn)定性差的產(chǎn)品，臨床配伍穩(wěn)定性研究應(yīng)至少包括兩批自制樣品（建議其中一批未近效期樣品），其他產(chǎn)品可采用一批自制樣品。對于生物制品國內(nèi)尚無明確的法規(guī)要求，大多數(shù)的生物制品穩(wěn)定性較差，若按照以上化藥的批次選擇的原則，生物制品上市申報時，是不是也得考察至少兩批自制樣品呢？讓我們拭目以待CDE后續(xù)的針對生物制品的法規(guī)要求。

02

試驗期間樣品放置條件

EMA和WHO規(guī)定應(yīng)盡可能模擬藥物使用的實際過程，考慮容器的填充體積以及使用前的配制和稀釋過程。如果在實際中需要抽取一定量的藥物或藥液，則試驗時應(yīng)模擬同樣的情形。取樣測定時應(yīng)置于實際的使用環(huán)境下進行。

ICH和FDA指出，產(chǎn)品復(fù)溶或稀釋后的穩(wěn)定性考察，為說明書中的產(chǎn)品復(fù)溶或稀釋配制、存儲條件和使用期限提供依據(jù)。

CDE在生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則以及創(chuàng)新藥（化學藥）III期臨床試驗藥學研究信息指南中均指明，此部分信息應(yīng)能支持臨床方案中的用法，以評估實際使用情況下產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

綜上，使用期間穩(wěn)定性樣品的放置條件應(yīng)盡可能模擬實際的使用過程，包括用法、用量以及待測樣品的放置條件。

03

考察指標

EMA和WHO指出，能反應(yīng)使用過程中穩(wěn)定性變化的物理、化學、生物及微生物指標需要被監(jiān)測，EMA提供示例如下：

物理：顏色、澄清度、包裝完整性、不溶性微粒、粒徑

化學：API含量、防腐劑含量、抗氧劑含量、pH

微生物：總菌落數(shù)、無菌

FDA還指出，針對無菌且使用前需要復(fù)溶（或進一步稀釋）的產(chǎn)品，申請人需要進行微生物試驗以支持說明書中產(chǎn)品復(fù)溶后或稀釋后的最差儲存條件，該試驗作為一項風險評估應(yīng)能證明復(fù)溶后或稀釋后的產(chǎn)品在擬定的儲存條件下，污染的外來微生物不會增長（即增長量不超過0.5log10）。

CDE在多篇已發(fā)表的公開文獻中指出，制劑與葡萄糖注射液進行配伍試驗時，需要考察5-羥甲基糠醛的變化情況。從近兩年CDE針對上市申請項目的補充資料通知中也可以看出，凡是與葡萄糖注射液配伍均被要求監(jiān)測5-羥甲基糠醛的變化情況。

此外，各指導(dǎo)原則均要求，使用期間的穩(wěn)定性測試所采用的分析方法必須經(jīng)過驗證（包括國內(nèi)要求的5-羥甲基糠醛的檢測方法），證明其精密度、靈敏度、準確度和重現(xiàn)性等符合相應(yīng)的要求。

從以上總結(jié)可以看出，不同方向?qū)τ谑褂闷陂g的穩(wěn)定性具體的要求也不同。在設(shè)計使用期間穩(wěn)定性試驗時，建議按照申報方向的具體要求，同時結(jié)合其他方向的要求，模擬真實使用情況，設(shè)計合理的試驗策略，全面考察臨床使用期間穩(wěn)定性。目前國內(nèi)對使用期間穩(wěn)定性試驗的具體要求還不是特別明確，尤其是針對生物制品使用期間穩(wěn)定性試驗的相關(guān)要求還有待完善。

關(guān)于皓陽生物

杭州皓陽生物技術(shù)有限公司成立于2015年，專注于為抗體/重組蛋白客戶提供早期成藥性評估、抗體藥物偶聯(lián)開發(fā)、穩(wěn)定細胞株構(gòu)建、工藝開發(fā)、中試生產(chǎn)、IND申報和臨床樣品生產(chǎn)，培養(yǎng)基開發(fā)定制等多平臺一站式研發(fā)服務(wù)。在上海杭州兩地設(shè)有研發(fā)中心和生產(chǎn)基地，目前擁有員工180余人。上海研發(fā)中心依托多種分析手段和瞬時表達平臺為客戶提供從人源化設(shè)計，活性分析到成藥性分析多維度的分子設(shè)計和評估。杭州中心擁有自主開發(fā)可授權(quán)的高表達穩(wěn)定細胞株平臺（皓越）和工藝開發(fā)平臺，建有完善的250L和500L規(guī)模原液和成品GMP生產(chǎn)線，能夠在8個月左右提供從DNA到毒理批樣品交付，12-15個月內(nèi)完成IND申報準備工作。同時公司還在建6*2000L商業(yè)化生產(chǎn)線，預(yù)計于2024年底陸續(xù)投入使用。皓陽生物致力于通過幫助新藥研發(fā)，推動生物醫(yī)藥領(lǐng)域的進步，實現(xiàn)創(chuàng)新為民、科技惠民的目標。

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